5.目的基因的获取与改造

基因体外重组

1、多选题:
‌粘性末端连接法是最常用的连接方法,具有许多优点,但是也有一些不足,请指出这些不足之处。‎
选项:
A: 载体易自身环化
B: 单酶切时外源DNA片段容易发生双向插入
C: 片段连接效率较低
D: 片段容易发生串联
答案: 【 载体易自身环化;
单酶切时外源DNA片段容易发生双向插入;
片段容易发生串联

2、多选题:
‍同聚物加尾连接法具有哪些优缺点?‌
选项:
A: 利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸,使其变为粘性末端;
B: 连接效率增高
C: 但容易发生自身环化
D: 方便回收外源片段
答案: 【 利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸,使其变为粘性末端;;
连接效率增高

3、多选题:
‌接头(linker)连接法及其优缺点有哪些?​
选项:
A: 人工合成的一小段有某种限制性内切核酸酶的识别序列的DNA分子
B: 可在DNA片段上制造出新的酶切位点;
C: 不需要考虑DNA片段上的酶切位点
D: 接头连接上后可直接跟对应的载体连接
答案: 【 人工合成的一小段有某种限制性内切核酸酶的识别序列的DNA分子;
可在DNA片段上制造出新的酶切位点;

4、填空题:
‌为了防止酶切后的载体自连,可以采取的策略包括:‎
答案: 【 提高外源DNA片段与载体DNA的比值;碱性磷酸酶脱去载体DNA5’端的磷酸

5、填空题:
‌定向克隆是指DNA用               消化时,产生带有             的片段,此种片段只能以               方向插入用相同的两种内切酶消化的载体中。‎‌‎
答案: 【 两种不同的限制性内切酶##%_YZPRLFH_%##非互补粘性末端##%_YZPRLFH_%##固定的

6.外源基因的原核表达系统

剩余75%内容付费后可查看

发表评论

电子邮件地址不会被公开。 必填项已用*标注