3.1 DNS-氨基酸的制备和鉴定

DNS-氨基酸的制备和鉴定单元测验

1、单选题:
‍在紫外灯下,DNS-氨基酸可产生(   )荧光。‏
选项:
A: 浅蓝色
B: 蓝绿色
C: 黄绿色
D: 浅粉色
答案: 【 黄绿色

2、单选题:
‏制备DNS-氨基酸时,反应液的pH值应该调至哪个范围?(   )‌
选项:
A: 5.5-7.5
B: 6.0-9.0
C: 7.5-9.5
D: 9.0-10.5
答案: 【 9.0-10.5

3、单选题:
​在用DNS法测定蛋白质或多肽的N-端氨基酸时,其大致的流程为(   )。‍
选项:
A: 先DNS化修饰,然后酸水解,最后进行层析分离鉴定。
B: 先酸水解,然后DNS化修饰,最后进行层析分离鉴定。
C: 先酸水解,然后进行层析分离,最后进行DNS化修饰并鉴定。
D: 先DNS化修饰,然后进行层析分离鉴定。
答案: 【 先DNS化修饰,然后酸水解,最后进行层析分离鉴定。

4、多选题:
‌本实验操作过程中,以下说法正确的是(   )。‏
选项:
A: 将DNS-Cl溶液和氨基酸混合,调好pH后,在40℃水浴避光反应2小时。
B: DNS-氨基酸制备完成后,取聚酰胺薄膜,点样面朝上,再距离相邻边缘各2cm处用铅笔画一相交的直线,作为点样原点。
C: 点样完成后,将聚酰胺薄膜光面向外卷曲(两边不接触),外扎牛皮筋固定。
D: 在开始展层前,展层剂的液面应高于点样原点。
答案: 【 将DNS-Cl溶液和氨基酸混合,调好pH后,在40℃水浴避光反应2小时。;
点样完成后,将聚酰胺薄膜光面向外卷曲(两边不接触),外扎牛皮筋固定。

5、多选题:
​下列氨基酸在进行DNS化修饰时,DNS-氨基酸产物不止一种的有(   )。‌
选项:
A: Lys
B: His
C: Tyr
D: Leu
答案: 【 Lys;
His;
Tyr

6、判断题:
‍层析是利用混合物的各组分在固定相和流动相分配系数的差异,从而达到分离的目的。分配系数差异越大,分离效果越好。(   )​
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确

7、判断题:
​DNS-OH是反应副产物,因发出蓝色荧光可以与DNS-氨基酸有所区别。(   )‍
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确

8、判断题:
‌点样时,点样直径应控制在2mm以内,且分次点样,每次点完后用热风吹干再点下一次。(   )​
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误

9、填空题:
​在 ____ 下观察层析结果,时间不宜过长,注意保护眼睛,必要时可戴防护镜。‏
答案: 【 紫外灯

10、填空题:
‎样品的迁移率是点样点到层析点 ____ 的距离与点样点到溶剂前沿的距离的比值。‏
答案: 【 中心

11、填空题:
‌根据本实验结果推断,DNS-Gly(A)与DNS-Leu(B)在展层剂I(即苯-冰醋酸)中展层,迁移率大的是 ____ (填“A”或“B”)。‍
答案: 【 B

3.2 离子交换柱层析法分离氨基酸

离子交换柱层析法分离氨基酸单元测验

1、单选题:
‏下列哪个方法是利用带电分子中电荷差异进行分离的?(   )‏
选项:
A: 疏水层析
B: 亲和层析
C: 离子交换层析
D: 凝胶过滤
答案: 【 离子交换层析

2、单选题:
‍以下说法错误的是(   )。‎
选项:
A: 树脂是惰性的不溶高分子化合物。
B: 阳离子交换树脂的功能基团是酸性的。
C: 阴离子交换树脂的功能基团是碱性的。
D: 阳离子交换树脂其可解离的OH⁻离子可与溶液相中的阳离子发生交换作用。
答案: 【 阳离子交换树脂其可解离的OH⁻离子可与溶液相中的阳离子发生交换作用。

3、多选题:
‍在一定pH条件下,下列说法正确的是?(   )‍
选项:
A: 等电点pI < pH时,蛋白带正电,能与阳离子交换剂结合。
B: 等电点pI < pH时,蛋白带负电,不能与阳离子交换剂结合。
C: 等电点pI > pH时,蛋白带正电,能与阳离子交换剂结合。
D: 等电点pI > pH时,蛋白带负电,不能与阳离子交换剂结合。
答案: 【 等电点pI < pH时,蛋白带负电,不能与阳离子交换剂结合。;
等电点pI > pH时,蛋白带正电,能与阳离子交换剂结合。

4、多选题:
‍除了离子交换柱层析以外,其他层析技术还有(   )。‌
选项:
A: 疏水层析:利用被分离物质与树脂上偶联的疏水性功能基团的亲和力不同。
B: 亲和层析:利用被分离物质与树脂上修饰的特异性基团的亲和力不同。
C: 凝胶过滤:利用被分离物质之间分子量大小的差异。
D: 聚焦层析:利用被分离物质之间等电点的差异。
答案: 【 疏水层析:利用被分离物质与树脂上偶联的疏水性功能基团的亲和力不同。;
亲和层析:利用被分离物质与树脂上修饰的特异性基团的亲和力不同。;
凝胶过滤:利用被分离物质之间分子量大小的差异。;
聚焦层析:利用被分离物质之间等电点的差异。

5、判断题:
​装柱后需要预先平衡。(   )‎
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确

6、判断题:
‌本实验的洗脱曲线中,Lys是穿过峰。(   )‎
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误

7、判断题:
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