大学MOOC 生物化学与分子生物学综合实验(北京师范大学)1205827829 最新慕课完整章节测试答案
1 无菌操作技术与主要仪器设备的使用
文章目录
- 1 无菌操作技术与主要仪器设备的使用
- 10 蛋白浓度及酶活性的测定
- 11碱性磷酸酶AKP的分离纯化
- 12 AKP蛋白纯化方案的评估
- 14 AKP的动力学性质分析
- 15AKP的特性分析
- 16 AKP多克隆抗体的制备及检测
- 17 实时荧光定量PCR方法检测小鼠脾细胞特定基因的表达
- 18 农杆菌介导的植物转基因技术(研学)
- 19 三亲接合法转化蓝藻(研学)
- 2 琼脂糖凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 20 Southern杂交(研学)
- 21 序列比对与BLAST实验(研学)
- 22 蛋白纯化系统纯化AKP(研学)
- 3 目的基因AKP扩增及PCR产物的检测与回收
- 4 质粒DNA提取及电泳检测
- 5 重组DNA的制备及大肠杆菌感受态细胞的转化
- 6 阳性重组子的筛选
- 7外源基因的诱导表达
- 8 外源基因表达产物的检测
- 9 凝胶过滤层析分离标准蛋白
无菌操作技术与主要仪器设备的使用单元测验
1、单选题:
1. 使用超净工作台进行无菌操作实验前,至少开启紫外灯照射杀菌 。
选项:
A: 5min
B: 15min
C: 30min
D: 10min
答案: 【 30min】
2、单选题:
制作固体平板时,加入抗生素时所用培养基的适宜温度一般为 。
选项:
A: 20-30℃
B: 30-40℃
C: 50-60℃
D: 70-80℃
答案: 【 50-60℃】
3、单选题:
制作酒精棉球常用的酒精浓度为 。
选项:
A: 50%
B: 75%
C: 85%
D: 95%
答案: 【 75%】
4、单选题:
配制LB固体培养基常用的琼脂浓度为 。
选项:
A: 1.0-2.0%
B: 4%
C: 3%
D: 0.3%
答案: 【 1.0-2.0%】
5、单选题:
LB培养基灭菌的常用方法是 。
选项:
A: 紫外线消毒
B: 煮沸法灭菌
C: 高压蒸汽灭菌
D: 干热灭菌
答案: 【 高压蒸汽灭菌】
6、单选题:
琼脂在LB固体培养基中的作用是提供 。
选项:
A: 碳源
B: 氮源
C: 生长因子
D: 凝固因子
答案: 【 凝固因子】
7、多选题:
关于视频中溶液的配制,下列说法正确的是 。
选项:
A: 配制溶液时,一般先调pH,然后再定容。
B: 使用酚-氯仿-异戊醇溶液时,需要吸取下层溶液使用。
C: 配制溶液Ⅰ时,可以使用0.5mol/L EDTA母液配制,也可以加入已称量好的EDTA干粉配制。
D: 配置好的50mg/mL羧苄青霉素溶液,可以直接使用,不用过滤除菌。
答案: 【 配制溶液时,一般先调pH,然后再定容。;
使用酚-氯仿-异戊醇溶液时,需要吸取下层溶液使用。;
配制溶液Ⅰ时,可以使用0.5mol/L EDTA母液配制,也可以加入已称量好的EDTA干粉配制。】
8、判断题:
使用离心机时,一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
9、判断题:
电子天平使用时一定要调水平,并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
10、判断题:
高压灭菌结束后,压力降到0 Mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
11、判断题:
配制EDTA溶液时,EDTA在碱性条件下才能溶解。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
12、判断题:
以水为溶剂配制的抗生素溶液需要过滤除菌后才能使用。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
13、判断题:
一般Tris 饱和酚用于分离 DNA,水饱和酚用于分离RNA
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
10 蛋白浓度及酶活性的测定
蛋白浓度及酶活性的测定单元测验
1、单选题:
以下测活方法中,最常用的是 。
选项:
A: 分光光度法
B: 荧光法
C: 同位素测定法
D: 电化学方法
答案: 【 分光光度法】
2、单选题:
测活时,需要测定酶促反应的初速率,其目的是 。
选项:
A: 节约底物
B: 尽快完成测定工作
C: 减少其他因素的影响
D: 准确反映酶的真实催化能力
答案: 【 准确反映酶的真实催化能力】
3、单选题:
乳酸脱氢酶催化的反应中,通过测定,得知在最适反应条件下,在0.1ml酶样品的作用下,每10分钟有0.3摩尔的丙酮酸分子被还原为乳酸,则1 ml酶样品所含的酶活力国际单位(IU)数为 。
选项:
A: 3,000
B: 30,000
C: 300,000
D: 3,000,000
答案: 【 300,000】
4、单选题:
连续法测活的正确步骤是 。①利用分光光度计连续测定吸光度的变化②将适量酶加入底物溶液中,快速混合③利用吸光度变化的动力学曲线计算酶活力④将酶与底物的混合液迅速转移入比色杯中,放入分光光度计
选项:
A: ①②③④
B: ②④①③
C: ③④①②
D: ②①④③
答案: 【 ②④①③】
5、多选题:
测定蛋白质浓度(含量)常用的方法有 。
选项:
A: 凯氏定氮法
B: Folin-酚试剂法
C: 考马斯亮蓝G-250法
D: 紫外光吸收法
答案: 【 凯氏定氮法;
Folin-酚试剂法;
考马斯亮蓝G-250法;
紫外光吸收法】
6、多选题:
考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质浓度的过程包括 。
选项:
A: 配制标准蛋白质溶液如1mg/mL BSA
B: 制作标准曲线
C: 测定待测样品蛋白质浓度
D: 根据标准曲线计算待测样品蛋白质浓度
答案: 【 配制标准蛋白质溶液如1mg/mL BSA;
制作标准曲线;
测定待测样品蛋白质浓度;
根据标准曲线计算待测样品蛋白质浓度】
7、多选题:
下列关于酶活力测定的描述中,错误的是 。
选项:
A: 酶活力的大小可通过测定反应物浓度的减少量或底物浓度的增加量来确定
B: 1个酶活力国际单位是指在最适反应条件下,1 分钟内能催化1mol底物转化为产物所需的酶量
C: 酶促反应速率越快,表明酶活力越高
D: 酶活力测定的最适温度通常是37摄氏度
答案: 【 1个酶活力国际单位是指在最适反应条件下,1 分钟内能催化1mol底物转化为产物所需的酶量;
酶活力测定的最适温度通常是37摄氏度】
8、多选题:
在用终止法测定酶活力时,以下哪些物质可用于配制终止液 。
选项:
A: 蛋白质变性剂
B: 酶的抑制剂
C: 酶的激活剂
D: 金属离子螯合剂
答案: 【 蛋白质变性剂;
酶的抑制剂;
金属离子螯合剂】
9、判断题:
在测定酶活力的实验中,底物的数量与酶的数量相比是过量的。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
10、判断题:
在测定酶活力时,通常测定产物浓度的变化,用于计算酶活力的大小。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
11、判断题:
在利用分光光度法测定酶活力时,吸光度的值总是由小变大。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
12、判断题:
在测定酶活力的实验中,将底物溶液加入酶溶液中。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
13、判断题:
紫外光吸收法可用于测定含有酪氨酸、色氨酸与苯丙氨酸的蛋白质样品的含量或浓度。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
11碱性磷酸酶AKP的分离纯化
碱性磷酸酶AKP的分离纯化单元测验
1、单选题:
下面哪种层析方法是依据蛋白分子量大小分离蛋白混合物的 。
选项:
A: 离子交换层析
B: 疏水层析
C: 亲和层析
D: 凝胶过滤
答案: 【 凝胶过滤】
2、单选题:
在pH 7.0的缓冲条件下,下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分离纯化 。
选项:
A: 5.0
B: 7.0
C: 8.5
D: 9.0
答案: 【 5.0】
3、单选题:
细胞破碎的正确方法包括 。
选项:
A: 加热
B: 激光
C: 超声破碎
D: 加入噬菌体
答案: 【 超声破碎】
4、多选题:
外源蛋白可以通过下列哪种途径表达 。
选项:
A: E.coli
B: 昆虫细胞
C: 啤酒酵母
D: 哺乳动物细胞
答案: 【 E.coli;
昆虫细胞;
啤酒酵母;
哺乳动物细胞】
5、多选题:
蛋白的哪种特性可以用来粗纯化 。
选项:
A: 是否结合金属
B: 热稳定
C: 等电点
D: 疏水性
答案: 【 是否结合金属;
热稳定;
等电点;
疏水性】
6、多选题:
蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化 。
选项:
A: 分子大小
B: 等电点
C: 热稳定
D: 与特定抗体的结合
答案: 【 分子大小;
等电点;
与特定抗体的结合】
7、多选题:
下面哪种层析技术中蛋白是先被吸附到了介质上 。
选项:
A: 离子交换层析
B: 疏水层析
C: 亲和层析
D: 凝胶过滤层析
答案: 【 离子交换层析;
疏水层析;
亲和层析】
8、多选题:
下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法 。
选项:
A: 超滤
B: 盐析
C: 真空冷冻干燥
D: 蒸发浓缩
答案: 【 超滤;
盐析;
真空冷冻干燥;
蒸发浓缩】
9、判断题:
如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化,那么通常会首先考虑亲和层析。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
10、判断题:
设计纯化实验时,尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
11、判断题:
在超声破碎时,可以连续超声5分钟,这样可以快速完成细胞破碎。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
12、判断题:
如果蛋白无法可溶表达,有时候可以加上一个标签使它以融合蛋白的形式表达可以得到可溶的表达产物。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
12 AKP蛋白纯化方案的评估
碱性磷酸酶分离纯化参数的测定单元测验
1、多选题:
下面哪些是蛋白纯化中我们需要评估的指标 。
选项:
A: 蛋白纯度
B: 蛋白回收率
C: 提纯倍数
D: 蛋白分子量
答案: 【 蛋白纯度;
蛋白回收率;
提纯倍数】
2、多选题:
下面哪种方法能够评估蛋白的样品均一性 。
选项:
A: SDS-PAGE
B: 酶活测试
C: Native PAGE
D: 凝胶过滤
答案: 【 Native PAGE;
凝胶过滤】
3、多选题:
下面哪种方法不能够评估蛋白的纯度 。
选项:
A: SDS-PAGE
B: 离子交换
C: 酶活测试
D: 质谱
答案: 【 离子交换;
酶活测试;
质谱】
4、多选题:
如果有一个蛋白A, 其分子量为40 KD。 它在Native PAGE上产生两条条带,下面哪种说法有可能具有合理性 。
选项:
A: 两条条带分别为单体和二聚体
B: 两条条带分别为单体和某个降解产物
C: 两条条带分别为单体和四聚体
D: 两条条带分别为二聚体和四聚体
答案: 【 两条条带分别为单体和二聚体 ;
两条条带分别为单体和某个降解产物;
两条条带分别为单体和四聚体;
两条条带分别为二聚体和四聚体】
5、判断题:
纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
6、判断题:
如果在SDS-PAGE上看到一条条带,我们可以断定该蛋白的纯度已经达到100%。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
7、判断题:
通过SDS-PAGE我们可以判断蛋白单体的分子量。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
8、判断题:
Native PAGE不能用于判定蛋白的分子量。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
9、判断题:
通过Native PAGE我们可以判定蛋白的聚合形式。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
10、判断题:
SDS-PAGE只能检测纯度但是无法检测样品的均一性。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
14 AKP的动力学性质分析
AKP的动力学性质分析单元测验
1、单选题:
根据稳态理论,酶促反应开始后,在一定时间内可保持不变的是 。这是推导米氏方程的重要前提。
选项:
A: [S]
B: [P]
C: [ES]
D: [EP]
答案: 【 [ES]】
2、单选题:
对于遵守米-曼氏动力学的酶来说,当底物浓度等于2Km时,酶促反应速率与Vmax之比为 。
选项:
A: 1/2
B: 2/3
C: 3/4
D: 4/3
答案: 【 2/3】
3、单选题:
为测定kcat值,首先需要测定 的值。
选项:
A: KI
B: Vmax
C: Km
D: Vmin
答案: 【 Vmax】
4、多选题:
酶促反应的各动力学参数中,与酶浓度无关的是 。
选项:
A: Ks
B: Vmax
C: Km
D: kcat
答案: 【 Ks;
Km;
kcat】
5、多选题:
以下关于Km的描述中,正确的是 。
选项:
A: Km在数值上等于酶促反应速度为最大反应速率一半时的底物浓度
B: Km的大小与酶的浓度有关
C: 同一种酶针对不同底物有不同Km值
D: Km值可用来精确地表示酶与底物之间的亲和程度
答案: 【 Km在数值上等于酶促反应速度为最大反应速率一半时的底物浓度;
同一种酶针对不同底物有不同Km值】
6、多选题:
测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时,需要注意的问题包括 。
选项:
A: 底物浓度需要过量
B: 考虑酶溶液的加入对底物浓度的影响作用
C: 严格控制反应条件(温度、pH值等)
D: 严格控制反应时间
答案: 【 底物浓度需要过量;
考虑酶溶液的加入对底物浓度的影响作用;
严格控制反应条件(温度、pH值等);
严格控制反应时间】
7、判断题:
酶促反应过程中,每一时刻的瞬时速率都不一样。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
8、判断题:
如果酶促反应在刚开始的一段时间内反应速率保持不变,则此段时间内的平均速率就能代表反应初速率。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
9、判断题:
测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时,需要保持酶浓度不变。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 正确】
10、判断题:
对于遵守米-曼氏动力学的酶来说,在双倒数图中,其动力学曲线与横轴的交点的数值为1/Km。
选项:
A: 正确
B: 错误
答案: 【 错误】
15AKP的特性分析
AKP的特性分析单元测验
1、单选题:
酶的反竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应 。
选项:
A: 使Vmax'不变,Km'增大
B: 使Vmax'减小,Km'不变
C: 使Vmax'减小,Km'增大
D: 使Vmax'减小,Km'减小
答案: 【
